什么是乙醇沉淀法?
乙醇沉淀也叫做醇沉法,是一个通过添加乙醇,从盐溶液中脱出想要物质的DNA提取过程。DNA是两个带负电荷磷酸盐糖骨架,沿核酸成键的双螺旋,因此钙或钠等带正电离子能被吸引到它的骨架。离子盐和DNA都容易溶于水,但很难溶解于乙醇,因为它们都需要水等极性溶剂才能分解。因此,在盐溶液中添加乙醇,会导致DNA形成颗粒,并从溶液沉淀出来。
DNA是一种极性分子。根据相似相溶原理,极性分子也容易溶解于极性溶剂。尽管容易溶解于水,但DNA不能溶于乙醇等较不极性的溶剂。乙醇仍然是极性分子,但它具有短的非极性碳链。正是这一极性的微小差异让乙醇发生沉淀,原因就是DNA不像水一样容易溶解于乙醇。
如果实验者在溶解DNA的水溶液中直接添加乙醇,分子不会沉淀。这是因为DNA仍然被水的极性分子包围,并且乙醇上的极性基团可以像盾牌一样,将带电荷DNA与不带电荷乙醇碳链分离开来。在该过程中,盐被证实是一个重要因素。
在添加乙醇之前,先将盐加入溶液,能将DNA从对水的依赖(极性屏障)中解脱出来。盐的正元素(水中游离和自由浮动的带正电荷离子)被带负电荷的DNA强烈吸引。这种盐吸引导致DNA变成被这些离子吸引,而不是被水分子的正极性吸引,因此在添加乙醇等低极性溶剂时很容易让其从水中沉淀出来,
通过让钙或其它正电荷离子被吸引到DNA上,然后通过增加乙醇减少水成分而使盐从溶液沉淀出来,科学家就能从溶液中取出DNA。许多研究依赖DNA分离,以及基因筛选和蛋白质表达的处理方法,因此许多实验者把乙醇沉淀视为一种宝贵的科学工具。
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